Model Answer
0 min readIntroduction
एफ.आई.एस.एच. (Fluorescence In Situ Hybridization) एक आणविक साइटोजेनेटिक तकनीक है जिसका उपयोग डीएनए या आरएनए अनुक्रमों का पता लगाने के लिए किया जाता है। यह तकनीक कोशिकाओं या ऊतकों में विशिष्ट जीनों या क्रोमोसोमल क्षेत्रों की पहचान करने में मदद करती है। एफ.आई.एस.एच. का उपयोग आनुवंशिक विकारों, कैंसर के निदान और रोग के पूर्वानुमान में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। यह तकनीक 1980 के दशक में विकसित हुई थी और तब से यह आणविक जीव विज्ञान और चिकित्सा आनुवंशिकी में एक महत्वपूर्ण उपकरण बन गई है।
एफ.आई.एस.एच. में प्रयुक्त संसाधन
एफ.आई.एस.एच. तकनीक में कई महत्वपूर्ण संसाधनों का उपयोग किया जाता है, जिनमें शामिल हैं:
- डीएनए जांच (DNA Probes): ये विशिष्ट डीएनए अनुक्रम होते हैं जिन्हें फ्लोरोसेंट डाई से लेबल किया जाता है। ये जांच लक्ष्य डीएनए या आरएनए अनुक्रमों के साथ जुड़ते हैं।
- फ्लोरोसेंट डाई (Fluorescent Dyes): विभिन्न रंगों की फ्लोरोसेंट डाई का उपयोग विभिन्न जीनों या क्रोमोसोमल क्षेत्रों को लेबल करने के लिए किया जाता है।
- क्रोमोसोमल स्प्रेड (Chromosomal Spreads): ये क्रोमोसोम होते हैं जिन्हें माइक्रोस्कोप स्लाइड पर फैलाया जाता है ताकि डीएनए जांच के साथ हाइब्रिडाइजेशन किया जा सके।
- फिक्सेटिव (Fixatives): ये रसायन कोशिकाओं या ऊतकों को संरक्षित करने के लिए उपयोग किए जाते हैं।
- हाइब्रिडाइजेशन बफर (Hybridization Buffer): यह बफर डीएनए जांच और लक्ष्य डीएनए के बीच हाइब्रिडाइजेशन को बढ़ावा देता है।
एफ.आई.एस.एच. में प्रयुक्त तकनीकें
एफ.आई.एस.एच. तकनीक में निम्नलिखित तकनीकों का उपयोग किया जाता है:
1. डीएनए जांच तैयार करना
डीएनए जांच को विशिष्ट डीएनए अनुक्रमों से प्राप्त किया जाता है और फ्लोरोसेंट डाई से लेबल किया जाता है। जांच को तैयार करने के लिए पीसीआर (Polymerase Chain Reaction) या डीएनए क्लोनिंग तकनीकों का उपयोग किया जा सकता है।
2. नमूना तैयार करना
नमूने (जैसे कोशिकाएं या ऊतक) को फिक्सेटिव से संसाधित किया जाता है और क्रोमोसोमल स्प्रेड तैयार किए जाते हैं।
3. हाइब्रिडाइजेशन
लेबल की गई डीएनए जांच को क्रोमोसोमल स्प्रेड के साथ हाइब्रिडाइज किया जाता है। हाइब्रिडाइजेशन बफर का उपयोग हाइब्रिडाइजेशन को बढ़ावा देने के लिए किया जाता है।
4. धुलाई (Washing)
अतिरिक्त जांच को हटाने के लिए स्लाइड को धोया जाता है।
5. इमेजिंग (Imaging)
फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग करके स्लाइड को देखा जाता है। फ्लोरोसेंट डाई से लेबल किए गए डीएनए जांच लक्ष्य डीएनए या आरएनए अनुक्रमों पर चमकते हैं।
एफ.आई.एस.एच. के अनुप्रयोग
- आनुवंशिक विकारों का निदान: डाउन सिंड्रोम, टर्नर सिंड्रोम और अन्य क्रोमोसोमल असामान्यताओं का पता लगाने के लिए एफ.आई.एस.एच. का उपयोग किया जाता है।
- कैंसर का निदान: कैंसर कोशिकाओं में विशिष्ट जीनों या क्रोमोसोमल परिवर्तनों का पता लगाने के लिए एफ.आई.एस.एच. का उपयोग किया जाता है।
- रोग का पूर्वानुमान: कैंसर के रोगियों में रोग के पूर्वानुमान का आकलन करने के लिए एफ.आई.एस.एच. का उपयोग किया जाता है।
- जीन मैपिंग: जीनों के स्थान का पता लगाने के लिए एफ.आई.एस.एच. का उपयोग किया जाता है।
- प्रजनन चिकित्सा: भ्रूण में आनुवंशिक असामान्यताओं का पता लगाने के लिए एफ.आई.एस.एच. का उपयोग किया जाता है।
| तकनीक | सिद्धांत | अनुप्रयोग |
|---|---|---|
| पीसीआर (PCR) | डीएनए के विशिष्ट खंडों की प्रतियों की संख्या को बढ़ाना। | जांच तैयार करना, डीएनए का प्रवर्धन। |
| डीएनए सीक्वेंसिंग | डीएनए में न्यूक्लियोटाइड के क्रम का निर्धारण करना। | जांच के अनुक्रम की पुष्टि करना। |
| फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी | फ्लोरोसेंट डाई से लेबल किए गए अणुओं को देखना। | लक्ष्य डीएनए या आरएनए अनुक्रमों की पहचान करना। |
Conclusion
एफ.आई.एस.एच. एक शक्तिशाली आणविक साइटोजेनेटिक तकनीक है जिसका उपयोग आनुवंशिक विकारों, कैंसर के निदान और रोग के पूर्वानुमान में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। यह तकनीक चिकित्सा आनुवंशिकी और आणविक जीव विज्ञान में एक महत्वपूर्ण उपकरण बन गई है। भविष्य में, एफ.आई.एस.एच. तकनीक को और अधिक संवेदनशील और विशिष्ट बनाने के लिए नए तरीकों का विकास किया जा सकता है, जिससे यह विभिन्न रोगों के निदान और उपचार में और भी अधिक उपयोगी हो सकेगी।
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