प्रतीप संकरण विधि

प्रोटोप्लास्ट संकरण विधि: एक विस्तृत विवरण

प्रोटोप्लास्ट संकरण एक जटिल प्रक्रिया है जिसमें कई चरण शामिल होते हैं। इसे निम्नलिखित भागों में विभाजित किया जा सकता है:

1. प्रोटोप्लास्ट का पृथक्करण (Protoplast Isolation)

प्रोटोप्लास्ट, पौधों की कोशिकाओं से कोशिका भित्ति को हटाकर प्राप्त किए जाते हैं। यह प्रक्रिया एंजाइमों (जैसे सेलुलेज, पेक्टिनेज) का उपयोग करके की जाती है, जो कोशिका भित्ति को विघटित कर देते हैं। पृथक्करण के बाद, प्रोटोप्लास्ट को एक उपयुक्त माध्यम में रखा जाता है ताकि वे जीवित रहें और आगे की प्रक्रिया के लिए तैयार रहें।

2. प्रोटोप्लास्ट का संलयन (Protoplast Fusion)

दो अलग-अलग पौधों के प्रोटोप्लास्ट को एक साथ फ्यूज करने के लिए विभिन्न विधियों का उपयोग किया जाता है:

• रासायनिक संलयन (Chemical Fusion): पॉलीइथिलीन ग्लाइकॉल (PEG) जैसे रसायनों का उपयोग प्रोटोप्लास्ट झिल्लियों को फ्यूज करने के लिए किया जाता है।
• विद्युत संलयन (Electrofusion): एक संक्षिप्त विद्युत आवेग प्रोटोप्लास्ट झिल्लियों को अस्थिर कर देता है, जिससे वे फ्यूज हो जाती हैं।
• मैकेनिकल संलयन (Mechanical Fusion): सूक्ष्म हेरफेर तकनीकों का उपयोग करके प्रोटोप्लास्ट को शारीरिक रूप से फ्यूज किया जाता है।

3. संकर कोशिका का चयन और पुनरुत्पादन (Selection and Regeneration of Hybrid Cells)

संलयन के बाद, संकर कोशिकाओं (Heterokaryons) को गैर-संलयित प्रोटोप्लास्ट से अलग किया जाता है। यह अक्सर चयनात्मक माध्यमों का उपयोग करके किया जाता है, जिसमें केवल संकर कोशिकाओं के जीवित रहने के लिए आवश्यक पोषक तत्व होते हैं। फिर, संकर कोशिकाओं को नई पादप कोशिकाओं में पुनरुत्पादित किया जाता है, जो संकर पौधे का विकास कर सकती हैं।

प्रोटोप्लास्ट संकरण के अनुप्रयोग

• नई पादप किस्मों का विकास: यह तकनीक विभिन्न पौधों की प्रजातियों के वांछनीय गुणों को एक ही पौधे में संयोजित करने में मदद करती है।
• रोग प्रतिरोधक क्षमता में सुधार: रोग प्रतिरोधी पौधों के प्रोटोप्लास्ट को संवेदनशील पौधों के प्रोटोप्लास्ट के साथ फ्यूज करके रोग प्रतिरोधी किस्में विकसित की जा सकती हैं।
• जैव प्रौद्योगिकी अनुसंधान: प्रोटोप्लास्ट संकरण का उपयोग जीन अभिव्यक्ति, प्रोटीन संश्लेषण और कोशिका संरचना के अध्ययन के लिए किया जाता है।
• साइटोप्लाज्मिक हाइब्रिड्स का निर्माण: यह तकनीक उन पौधों में जीन को स्थानांतरित करने में उपयोगी है जो यौन रूप से संगत नहीं हैं।

प्रोटोप्लास्ट संकरण की सीमाएं

• निम्न दक्षता: संलयन और पुनरुत्पादन की प्रक्रियाएं अक्सर कम दक्षता वाली होती हैं।
• आनुवंशिक अस्थिरता: संकर पौधों में आनुवंशिक अस्थिरता की संभावना होती है।
• तकनीकी जटिलता: प्रोटोप्लास्ट संकरण एक जटिल और श्रमसाध्य प्रक्रिया है जिसके लिए विशेष उपकरणों और विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है।

विधि	फायदे	नुकसान
रासायनिक संलयन (PEG)	सरल और सस्ती	कम दक्षता, कोशिका क्षति की संभावना
विद्युत संलयन	उच्च दक्षता, कोशिका क्षति कम	महंगा, विशेष उपकरणों की आवश्यकता