Model Answer
0 min readIntroduction
एलिसा (ELISA) यानी एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट एसे (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) एक जैव रासायनिक तकनीक है जिसका उपयोग किसी नमूने में एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने और मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है। यह प्रतिरक्षा विज्ञान, चिकित्सा निदान, खाद्य सुरक्षा और अनुसंधान जैसे विभिन्न क्षेत्रों में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। एलिसा एक अत्यधिक संवेदनशील और विशिष्ट तकनीक है जो कम मात्रा में लक्ष्य अणुओं का पता लगाने में सक्षम है। इसका आविष्कार 1971 में स्वीडिश वैज्ञानिक पीटर परल्मैन और इवा इंगलमैन द्वारा किया गया था।
एलिसा का सिद्धांत
एलिसा का सिद्धांत एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया पर आधारित है। जब एक एंटीजन एक विशिष्ट एंटीबॉडी से बंधता है, तो एक प्रतिरक्षा परिसर बनता है। एलिसा में, इस प्रतिक्रिया का उपयोग एक एंजाइम को बांधने के लिए किया जाता है, जो एक दृश्यमान संकेत उत्पन्न करता है। संकेत की तीव्रता लक्ष्य अणु की मात्रा के सीधे आनुपातिक होती है। एलिसा में मुख्य रूप से निम्नलिखित प्रकार होते हैं:
- डायरेक्ट एलिसा: एंटीजन सीधे प्लेट से बंधा होता है और एंजाइम-संयुग्मित एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है।
- इनडायरेक्ट एलिसा: एंटीजन प्लेट से बंधा होता है, फिर एक प्राथमिक एंटीबॉडी और उसके बाद एक एंजाइम-संयुग्मित द्वितीयक एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है।
- सैंडविच एलिसा: एंटीजन को दो एंटीबॉडी के बीच सैंडविच किया जाता है, एक प्लेट से बंधा होता है और दूसरा एंजाइम-संयुग्मित होता है।
- कॉम्पिटिटिव एलिसा: एंटीजन और एंटीबॉडी दोनों को एक साथ प्लेट पर जोड़ा जाता है, और प्रतिस्पर्धा के आधार पर संकेत मापा जाता है।
एलिसा की कार्यप्रणाली
एलिसा की कार्यप्रणाली में निम्नलिखित चरण शामिल हैं:
- प्लेट कोटिंग: एक माइक्रोप्लेट के कुओं को एंटीजन या एंटीबॉडी के साथ लेपित किया जाता है।
- ब्लॉकिंग: गैर-विशिष्ट बंधन को रोकने के लिए प्लेट को ब्लॉकिंग बफर से उपचारित किया जाता है।
- एंटीबॉडी जोड़ना: नमूने को प्लेट में जोड़ा जाता है, जिससे एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया होती है।
- एंजाइम-संयुग्मित एंटीबॉडी जोड़ना: एक एंजाइम-संयुग्मित एंटीबॉडी को जोड़ा जाता है जो पहले एंटीबॉडी से बंधता है।
- सबस्ट्रेट जोड़ना: एक सबस्ट्रेट जोड़ा जाता है जो एंजाइम द्वारा प्रतिक्रिया करता है, जिससे एक दृश्यमान संकेत उत्पन्न होता है।
- माप: संकेत की तीव्रता को एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके मापा जाता है।
एलिसा के अनुप्रयोग
एलिसा के विभिन्न क्षेत्रों में व्यापक अनुप्रयोग हैं:
- रोग निदान: एचआईवी, हेपेटाइटिस, लाइम रोग और अन्य संक्रामक रोगों का निदान करने के लिए एलिसा का उपयोग किया जाता है।
- गर्भावस्था परीक्षण: एलिसा का उपयोग गर्भावस्था हार्मोन एचसीजी (मानव कोरियोनिक गोनाडोट्रोपिन) का पता लगाने के लिए किया जाता है।
- खाद्य सुरक्षा: खाद्य पदार्थों में एलर्जी, विष और अन्य दूषित पदार्थों का पता लगाने के लिए एलिसा का उपयोग किया जाता है।
- अनुसंधान: एलिसा का उपयोग प्रोटीन, हार्मोन और अन्य अणुओं की मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है।
- पर्यावरण निगरानी: एलिसा का उपयोग जल और मिट्टी में प्रदूषकों का पता लगाने के लिए किया जाता है।
| अनुप्रयोग | उदाहरण |
|---|---|
| रोग निदान | एचआईवी एंटीबॉडी का पता लगाना |
| गर्भावस्था परीक्षण | मूत्र में एचसीजी का पता लगाना |
| खाद्य सुरक्षा | दूध में एफिलोटोक्सिन का पता लगाना |
Conclusion
संक्षेप में, एलिसा एक शक्तिशाली और बहुमुखी जैव रासायनिक तकनीक है जिसका उपयोग विभिन्न क्षेत्रों में एंटीजन या एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने और मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है। इसकी उच्च संवेदनशीलता, विशिष्टता और उपयोग में आसानी इसे अनुसंधान, निदान और निगरानी के लिए एक मूल्यवान उपकरण बनाती है। भविष्य में, एलिसा तकनीक में और सुधार होने की संभावना है, जिससे यह और भी अधिक सटीक और कुशल हो जाएगी।
Answer Length
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