UPSC MainsANI-HUSB-VETER-SCIENCE-PAPER-II201215 Marks
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Q6.

ऊतकों के पैराफिन परिच्छेदन हेतु संसाधन की क्रिया-विधि ।

How to Approach

This question requires a detailed explanation of the paraffin sectioning process, a crucial step in histopathology. The approach should be to first define paraffin sectioning and its importance. Then, systematically explain the resources (equipment and materials) involved and their respective functions. Finally, a brief discussion on quality control and potential pitfalls should be included to demonstrate a comprehensive understanding. A diagrammatic representation (if possible within the text format) could enhance clarity. The answer should be structured logically with clear headings and subheadings.

Model Answer

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Introduction

ऊतक परिच्छेदन (Tissue sectioning) पशु चिकित्सा विज्ञान और निदान संबंधी पैथोलॉजी (Diagnostic pathology) में एक महत्वपूर्ण प्रक्रिया है। यह प्रक्रिया ऊतकों के पतले स्लाइस बनाने के लिए उपयोग की जाती है, जिनका सूक्ष्मदर्शी (microscope) के तहत अध्ययन किया जाता है ताकि रोगों का निदान किया जा सके। पैरालिन (Paraffin) एक मोम है जो ऊतक को स्थिर करने और उन्हें स्लाइस में काटने के लिए उपयोग किया जाता है। यह ऊतक को सख्त बनाता है, जिससे इसे पतले, समान स्लाइस में काटना आसान हो जाता है। आधुनिक पशु चिकित्सा निदान में, ऊतक के पैरालिन परिच्छेदन के लिए संसाधनों की क्रियाविधि को समझना आवश्यक है।

पैरालिन परिच्छेदन: एक अवलोकन

पैरालिन परिच्छेदन एक बहु-चरणीय प्रक्रिया है जिसमें ऊतक को संसाधित करने, एम्बेडिंग, सेक्शनिंग और स्टैनिंग (staining) शामिल हैं। यह प्रक्रिया ऊतक के सूक्ष्मदर्शी के नीचे देखने के लिए तैयार करने के लिए आवश्यक है।

संसाधन और उनकी क्रियाविधि

1. ऊतक का संग्रह और निर्धारण (Tissue Collection and Fixation)

सबसे पहले, ऊतक का उचित संग्रह महत्वपूर्ण है। ऊतक को तुरंत एक उपयुक्त निर्धारण विलयन (fixative) में रखा जाना चाहिए, आमतौर पर 10% फॉर्मेलिन (Formalin) या बफर्ड फॉर्मेलिन। निर्धारण ऊतक को सड़ने से रोकता है और इसके आकार और संरचना को संरक्षित करता है।

  • निर्धारण विलयन (Fixative) का कार्य: ऊतक के प्रोटीन को स्थिर करना, एंजाइम गतिविधि को रोकना और ऊतक को सिकुड़ने से बचाना।
  • समय: ऊतक को जितना जल्दी हो सके निर्धारण विलयन में रखा जाना चाहिए, आदर्श रूप से संग्रह के 24 घंटे के भीतर।

2. निर्जलीकरण और पारगम्य बनाना (Dehydration and Clearing)

निर्धारित ऊतक को फिर निर्जलित किया जाता है, जो अल्कोहल श्रृंखला (आमतौर पर 70%, 80%, 90% और 100% इथेनॉल) का उपयोग करके ऊतक से पानी को हटाने की प्रक्रिया है। इसके बाद, ऊतक को एक स्पष्ट करने वाले एजेंट (clearing agent) जैसे कि ज़ाइलिन (Xylene) या टोलुइन (Toluene) से साफ किया जाता है, जो अल्कोहल को हटाता है और ऊतक को पैरालिन में प्रवेश करने के लिए तैयार करता है।

  • अल्कोहल का कार्य: ऊतक से पानी निकालना।
  • ज़ाइलिन/टोलुइन का कार्य: अल्कोहल को हटाना और ऊतक को पैरालिन में प्रवेश करने के लिए तैयार करना।

3. एम्बेडिंग (Embedding)

निर्जलित और साफ किए गए ऊतक को फिर पैरालिन में एम्बेड किया जाता है। पैरालिन को पिघलाया जाता है और ऊतक को सावधानीपूर्वक डाला जाता है। पैरालिन ठंडा होने और सख्त होने पर ऊतक एक ठोस ब्लॉक में एम्बेड हो जाता है।

  • पैरालिन का कार्य: ऊतक को सहारा देना और इसे सेक्शनिंग के लिए तैयार करना।
  • एम्बेडिंग मशीन: कुछ प्रयोगशालाएं एम्बेडिंग मशीन का उपयोग करती हैं जो प्रक्रिया को स्वचालित करती है।

4. सेक्शनिंग (Sectioning)

एम्बेडेड ऊतक को फिर एक माइक्रोम (Microtome) का उपयोग करके पतले स्लाइस में काटा जाता है। माइक्रोम एक सटीक उपकरण है जो ऊतक ब्लॉक को काटता है। स्लाइस की मोटाई आमतौर पर 4-10 माइक्रोमीटर होती है।

  • माइक्रोम: यह उपकरण ऊतक ब्लॉक को पतली स्लाइस में काटने के लिए प्रयोग किया जाता है।
  • ब्लेड: माइक्रोम ब्लेड आमतौर पर स्टील या हीरे से बने होते हैं।
  • मोटाई: स्लाइस की मोटाई 4-10 माइक्रोमीटर के बीच होती है।

5. स्टैनिंग (Staining)

सेक्शन किए गए स्लाइस को फिर एक स्लाइड पर रखा जाता है और स्टैनिंग (Staining) की जाती है। स्टैनिंग ऊतक के विभिन्न घटकों को रंगीन करती है, जिससे उन्हें माइक्रोस्कोप के तहत देखना आसान हो जाता है। हीमेटॉक्सिलिन और इओसिन (H&E) सबसे आम स्टैनिंग विधि है।

  • हीमेटॉक्सिलिन और इओसिन (H&E): यह एक सामान्य स्टैनिंग विधि है जो नाभिक (nuclei) को नीले या बैंगनी रंग में और साइटोप्लाज्म (cytoplasm) को गुलाबी रंग में रंगती है।

उपकरण (Equipment)

उपकरण कार्य
फॉर्मेलिन निर्धारण कक्ष ऊतक के नमूने को सुरक्षित रूप से निर्धारित करने के लिए
माइक्रोम पतली ऊतक स्लाइस काटने के लिए
माइक्रोस्कोप ऊतक स्लाइस का निरीक्षण करने के लिए
सेंट्रीफ्यूज द्रव को अलग करने के लिए

गुणवत्ता नियंत्रण (Quality Control)

गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रिया के प्रत्येक चरण में महत्वपूर्ण है। इसमें स्लाइस की मोटाई, ऊतक का रंग और संरचना की जांच करना शामिल है।

Conclusion

पैरालिन परिच्छेदन पशु चिकित्सा निदान में एक महत्वपूर्ण प्रक्रिया है। संसाधनों की क्रियाविधि को समझना सटीक और विश्वसनीय निदान के लिए आवश्यक है। प्रक्रिया में शामिल प्रत्येक चरण को सावधानीपूर्वक निष्पादित किया जाना चाहिए, और गुणवत्ता नियंत्रण उपायों को लागू किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि स्लाइस उच्च गुणवत्ता के हैं। भविष्य में, बेहतर गुणवत्ता वाले ब्लेड और स्वचालित माइक्रोम के विकास से प्रक्रिया की दक्षता और सटीकता में और सुधार हो सकता है।

Answer Length

This is a comprehensive model answer for learning purposes and may exceed the word limit. In the exam, always adhere to the prescribed word count.

Additional Resources

Key Definitions

हेमेटॉक्सिलिन और इओसिन (H&E)
एक सामान्य ऊतक स्टैनिंग विधि जो नाभिक को नीले या बैंगनी रंग में और साइटोप्लाज्म को गुलाबी रंग में रंगती है, जिससे सूक्ष्मदर्शी के नीचे ऊतक संरचनाओं को आसानी से देखा जा सकता है।
माइक्रोम (Microtome)
एक सटीक उपकरण जिसका उपयोग ऊतक ब्लॉक को पतली स्लाइस में काटने के लिए किया जाता है, जो माइक्रोस्कोपी के लिए आवश्यक है।

Key Statistics

पशु चिकित्सा निदान में, हीमेटॉक्सिलिन और इओसिन (H&E) स्टैनिंग का उपयोग 80% से अधिक ऊतक नमूनों के मूल्यांकन के लिए किया जाता है।

Source: अनुमानित - पशु चिकित्सा निदान संबंधी साहित्य

माइक्रोम ब्लेड की औसत लागत ₹10,000 से ₹30,000 तक हो सकती है, ब्लेड की गुणवत्ता और सामग्री के आधार पर।

Source: अनुमानित - प्रयोगशाला उपकरण आपूर्तिकर्ताओं से जानकारी

Examples

पशु चिकित्सा निदान में पैरालिन परिच्छेदन का उपयोग

एक घोड़े में त्वचा के ट्यूमर (Tumor) का निदान करने के लिए, ऊतक का नमूना लिया जाता है और पैरालिन परिच्छेदन के माध्यम से संसाधित किया जाता है। फिर, माइक्रोस्कोप के नीचे ऊतक स्लाइस का मूल्यांकन किया जाता है ताकि कैंसर कोशिकाओं की उपस्थिति की पुष्टि की जा सके और ट्यूमर के प्रकार का निर्धारण किया जा सके।

Frequently Asked Questions

क्या ऊतक के नमूने को निर्धारण (fixation) में देरी करने से निदान पर प्रभाव पड़ सकता है?

हाँ, ऊतक के नमूने को निर्धारण में देरी करने से ऊतक संरचना में परिवर्तन हो सकता है, जिससे निदान मुश्किल हो सकता है। इसलिए, नमूने को जल्द से जल्द निर्धारण विलयन में रखा जाना चाहिए।

Topics Covered

Veterinary SciencePathologyHistologyTissue ProcessingLaboratory Techniques